摘要：

鉴于贝蛔虫对大熊猫、小熊猫的危害及日益严重的耐药性问题，本研究拟通过克隆与异源表达方式获得苏力菌（Bacillus thuringiensis）Bt2-56重组Cry21A蛋白，并评价其对大熊猫、小熊猫贝蛔虫的离体杀灭活性。结果表明，Bt2-56 Cry21A全长2 856bp，编码951个氨基酸，分子量为105.332 kDa，包含CBM6-CBM35-CBM36_like结构域。表达分析显示，重组Cry21A蛋白（rCry21A）以分泌形式表达，在0.8 mmol/L IPTG诱导时上清液表达量最大。通过体外暴露试验评估rCry21A蛋白对贝蛔虫的杀灭活性，结果表明，rCry21A对大熊猫、小熊猫贝蛔虫幼虫及成虫均有抑杀活性，且表现剂量依赖性。其中，rCry21A对大熊猫西氏贝蛔虫L4期幼虫和成虫作用后第3天的ED₅₀值分别为12.5 µg/mL和9.2 µg/mL，第7天的ED₅₀值分别为0.15 µg/mL和0.08 µg/mL；rCry21A对小熊猫贝蛔虫L4期幼虫和成虫作用后第3天的ED₅₀值分别为9.7 µg/mL和6.6 µg/mL，第7天的ED₅₀值分别为0.11 µg/mL和0.07 µg/mL，表明rCry21A对贝蛔虫成虫及小熊猫贝蛔虫更具杀虫活性。本研究证实了rCry21A蛋白的高效杀线虫活性，表明其有望被开发成为一种新型、环保的抗大熊猫和小熊猫贝蛔虫生物制剂，为解决当前贝蛔虫耐药性问题提供了具有潜力的替代策略。 

关键词:

大熊猫, 小熊猫, 贝蛔虫, Cry21A, 杀虫活性