为探究发情期雄性双峰驼 (Camelus ferus) 尿液的代谢差异,以期为双峰驼繁殖调控机制提供理论依据。本研究采集发情期 (Breeding season, BS) (n = 6) 和非发情期 (Non‑breeding season, NBS) (n = 6) 雄性双峰驼尿液,利用气相/液相色谱-质谱 (Gas/Liquid chromatography‑mass spectrometry, GC/LC‑MS) 技术,筛选尿液中差异表达代谢物 (Differentially expressed metabolites, DEMs);基于人类代谢组数据库 (Human Metabolome Database, HMDB) 和京都基因与基因组百科全书 (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG) 数据库鉴定尿液中影响双峰驼季节性发情的关键功效物质及其通路。结果显示,GC‑MS鉴定代谢物468个,LC‑MS鉴定代谢物6 193个。以NBS为对照,BS组GC/LC‑MS分别鉴定到205个和601个DEMs (P < 0.05),主要为苯及其取代衍生物、脂肪酰、吲哚及其衍生物和有机氮化合物等。GC/LC‑MS KEGG富集分析鉴定获得12条相同通路,GC/LC‑MS维恩鉴定获得L-组氨酸、5'-甲硫基腺苷、3-甲基组氨酸、L-蛋氨酸和三醋精5种共有DEMs。结果表明,L-组氨酸和L-蛋氨酸可通过氨基酸-tRNA的生物合成和组氨酸代谢通路,影响精子发生和生殖健康,从而进一步影响雄性双峰驼发情。此外,基于L-组氨酸和L-蛋氨酸在雌性动物中的作用,推测这两种DEMs可能作为信息素影响雌性双峰驼的性激素合成,进而诱导母驼发情。KEGG富集分析表明,雄性双峰驼发情还与TCA循环、精氨酸的生物合成途径、GABA能信号传导及丙酮酸代谢调控的精子活力和生殖健康有关。上述结果为深入解析双峰驼繁殖调控机制研究提供了重要参考。